作者:佚名       来源于:世界营销策划网

用放射性同位素或荧光物质标记的特异DNA或RNA分子,通过分子杂交技术检测与之互补的核苷酸顺序的技术。核酸分子探针的制备方法有以下几种:

缺口移位标记 DNA水解酶I能够使双链DNA分子产生缺口。DNA聚合酶能将缺口从5′→3′方向扩大,同时将5′端的核苷酸切除,此酶还同时具有5′→3′聚合功能,在有4种单核苷酸(dNTP)的反应系统中将切去的核苷酸补上。缺口沿着DNA的另一条链位移,同时有放射性的核苷酸就会掺入DNA分子中,成为有高比放性的DNA探针。一般单核苷酸标记的掺入量30%,比放性可达108cpm/μg DNA。

T4DNA聚合酶标记 T4 DNA聚合酶有核酸外切酶作用,在没有dNTP的条件下,从3′→5′切除核苷 ......




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